1.0 Determinacion de las condiciones optimas para la extraccion de azucares a partir de Bagaco (residuos de la uva despues de hacer el vino ).
Objectivo
- Determinar las condiciones optimas para la extraccion de azucares a partir de bagaco.
1.1 Materiales y metodos
Preparacion de los extractos
12 extractos fueron preparados homogenizando 15 gramos de bagaco blanco con 135 ml de agua destilada usando una batidora. Las doce muestras fueron colocadas en un bano de agua usando 3 temperaturas diferentes (75 °C, 60°C ,40°C ) entre 0.5-3 horas.Los extractos fueron filtrados con papel Whatman nº 1.
4 ml de cada extracto fueron centrifugados en tubos Eppendorf a 14000 rpm/min durante 5 minutos. Los sobredanadantes fueron filtrados a traves de filtros 0.45 µm Membra-fil ., antes de ser analizados en HPLC.
HPLC
El aparato de HPLC( High-performance liquid chromatography; Spectra physics ) fue equipado con un detector de indice de refraccion (RI).
Glucosa y fructosa fueron separadas en una columna 5 µm 25 x 4.5 cm NH2, a temperatura ambiente .La fase movil fue Acetonitrilo:agua (80:20) , y el flujo fue de 2 ml/min.
Glucosa y fructosa comerciales (Sigma) fueron usados para la calibracion del cromatografo.
1.2 Resultados y discusion
Los resultados muestran que las mejores condiciones para la maxima extraccion de azucares (glucosa y fructosa) fueron 60 ºC y 2 horas.
2.0 Uso de bagaco para la produccion de celulosa bacteriana.
Objectivo
Examinar las posibilidades de usar el extracto de azucares de bagaco como medio para la produccion de celulosa bacteriana porAcetobacter xylinum
2.1 Materiales y métodos
Preparación del medio
30 gramos de bagaço blanco fueron homogenizados con 270 ml de agua destilada usando una batidora. El homogenizado fue colocado en un baño de agua a 60 ºC durante 2 horas.
El extracto fue filtrado con papel Whatman nº 1, y el pH fue ajustado a pH 5 con 1 N NaOH.
100 ml de este extracto en un frasco Erlenmeyer de 250 ml fueron autoclavados a 121 ºC durante 15 minutos.
Tras enfriar a temperatura ambiente el frasco fue inoculado con Acetobacter xylinum, y después fue incubado a 30 ºC.
2.2 Resultados y discusións
Después de 6 dias, una capa de celulosa fue encontrada creciendo en la superficie del medio.
Ese resultado muestra que el extracto de bagaço puede ser usado como medio para la producción de celulosa por Acetobacter xylinum.